發(fā)布時(shí)間: 2025-09-23 點(diǎn)擊次數(shù): 76次
明膠蛋白胨是胰酶消化動(dòng)物明膠所得的蛋白胨,胱氨酸和色氨酸含量低,甘氨酸和脯氨酸含量高,且不含有可發(fā)酵的碳水化合物,營養(yǎng)較低。比較適合于糖醇發(fā)酵中提供氮源和制備低營養(yǎng)培養(yǎng)基。本品為淡黃色至類白色粉末。
蛋白胨是動(dòng)物蛋白為基質(zhì),經(jīng)過消化、過濾、濃縮、噴霧干燥而得到的一種淺黃色至類白色的干燥粉末。易溶于水,水溶液呈淡黃色。營養(yǎng)豐富可做多種培養(yǎng)基的原材料。在當(dāng)中它起的主要作用是提供氮源。細(xì)菌學(xué)蛋白胨含有豐富的蛋白多肽、低肽、氨基酸成分和礦物質(zhì)。由于用蛋白為原料以及特定的媒介條件,使其含有豐富的色氨酸、脯氨酸、纈氨酸、亮氨酸、賴氨酸。這些氨基酸是細(xì)菌生長(zhǎng)所需的重要成分和生長(zhǎng)因子。
一、儲(chǔ)存條件
密封保存
明膠蛋白胨易吸潮結(jié)塊,需密封包裝(如鋁箔袋或玻璃瓶)存放,避免與空氣長(zhǎng)時(shí)間接觸。
避光干燥
儲(chǔ)存環(huán)境應(yīng)陰涼、干燥,溫度建議控制在15-25℃,避免陽光直射或高溫環(huán)境(如暖氣旁)。
防污染
遠(yuǎn)離化學(xué)品、強(qiáng)氧化劑或揮發(fā)性物質(zhì),防止交叉污染或成分變質(zhì)。
二、配制方法
溶解溫度控制
明膠蛋白胨含明膠成分,高溫易凝固。配制培養(yǎng)基時(shí),建議先加其他成分(如瓊脂、糖類),待水溫降至40-50℃后再加入明膠蛋白胨,充分?jǐn)嚢枞芙狻?/div>
若需高溫滅菌(如121℃),需確保配方中其他成分(如瓊脂)能耐受高溫,或調(diào)整滅菌程序(如分段滅菌)。
pH調(diào)節(jié)
溶解后檢查培養(yǎng)基pH,根據(jù)目標(biāo)微生物需求調(diào)整(如細(xì)菌培養(yǎng)基通常pH 7.0-7.4),避免明膠蛋白胨影響酸堿度。
過濾除菌(可選)
對(duì)熱敏感成分或需無菌操作時(shí),可采用0.22μm濾膜過濾除菌,替代高溫滅菌。
三、滅菌處理
高壓蒸汽滅菌
常規(guī)滅菌條件為121℃、15-20分鐘。但需注意:
明膠蛋白胨含蛋白質(zhì),長(zhǎng)時(shí)間高溫可能導(dǎo)致營養(yǎng)損失或美拉德反應(yīng)(產(chǎn)生褐色沉淀)。
若培養(yǎng)基含其他熱敏感成分(如維生素),需優(yōu)化滅菌時(shí)間或采用低溫間歇滅菌法。
滅菌后檢查
觀察培養(yǎng)基是否澄清、無沉淀或異味。若出現(xiàn)渾濁或異常顏色,可能因滅菌過度或成分不兼容,需重新配制。
四、使用注意事項(xiàng)
目標(biāo)微生物適配性
明膠蛋白胨適用于需氮源豐富的微生物(如細(xì)菌、真菌),但某些特殊菌種(如自養(yǎng)型微生物)可能需其他氮源(如硝酸鹽)。
濃度控制
典型用量為0.5%-2%(w/v),過高可能導(dǎo)致滲透壓失衡或代謝產(chǎn)物抑制生長(zhǎng)。
避免反復(fù)凍融
配制后的培養(yǎng)基若需長(zhǎng)期保存,應(yīng)分裝后冷凍,避免反復(fù)解凍導(dǎo)致明膠蛋白胨降解。
與瓊脂的兼容性
若培養(yǎng)基含瓊脂,需確保明膠蛋白胨與瓊脂比例適當(dāng)(如瓊脂1.5%-2%),避免凝固異常。